导读
● BEL-7402、BEL-7404细胞株与上篇所述的SMMC-7721情况一样,也是70年代由国内实验室建系。最初的BEL-7402、BEL-7404,不仅帮助我们阐明了人肝癌细胞的生物学特性,也为肝癌治疗、其他相关研究提供了一个理想的肝癌实验模型。

(图片来源:ICLAC Database)
● 随着在国内实验室中广泛使用,由于交叉污染、标记错误等原因,致使BEL-7402、BEL-7404也被HELA污染(部分BEL-7402被HCT-8污染)。
BEL-7402、BEL-7404于1974年由中国科学院上海细胞生物学研究所建立:1974年2月19日,BEL-7402从上海市中山医院一名53岁男性肝癌患者体内获得,同年7月19日,从一名69岁男性肝癌患者体内获得BEL-7404。两名患者术前AFP测定均为阳性, 病理学诊断为原发性肝细胞癌。两株细胞株分别历时14、7天后,组织小块周围开始长出细胞,初期细胞形态均先是上皮样细胞,继有梭形细胞。第三代传代培养后,均每隔6-7天即可传代一次。
我们发现BEL-7402、BEL-7404被HELA污染,经历了与SMMC-7721一样的过程:2010年之前,SCI期刊未要求作者须提交细胞株鉴定报告,因此国内科研人员进行基础研究及文章投稿时,无鉴定细胞株的意识,这间接导致了被污染及实验室间的进一步扩散;2010年后,细胞株鉴定被SCI主流杂志、相关权威机构真正重视后,BEL-7402、BEL-7404相继被发现存在交叉污染的现象。有文献也显示:部分BEL-7402被HCT-8污染。

(图片来源:ExPASy Database)
还是2015年Fang Ye等人在FASEB J.上的那篇文章,报道了BEL-7402细胞株已经被污染:380个样本中有两株分别来源于不同实验室的BEL-7402,分型数据提示,一株与HELA的STR数据一致,另一株则与HCT-8一致。两年后,Xiaocui Bian等人对国内482株人源肿瘤细胞的交叉污染调查中,进一步验证了BEL-7402被HELA污染。同年,PLoS One及J Hepatol的两篇文章报道了BEL-7404被HELA污染(两篇文章也都揭示了BEL-7402被HELA污染)。

(图片来源:Yaqing Huang et al., 2017)
截止目前,鉴达受理的BEL-7402、BEL-7404分别为16株、11株。与ExPASy、DSMZ数据库重新比对确认后,实际鉴定结果显示:BEL-7402有10株为HELA,1株为HepG2,4株为HCT-8,1株为NOT Human Origin;BEL-7404有9株为HELA,2株为HuH7。鉴达受理的BEL-7402、BEL-7404鉴定结果,同样验证了这两株细胞株被HELA、HCT-8污染的事实。

(图片来源:鉴达所受理BEL-7402、BEL-7404鉴定结果)
结合文献报道、各数据库信息及鉴达鉴定结果,对于专注肝癌方面基础研究的实验室,鉴达同样不推荐使用BEL-7402、BEL-7404来开展相关实验!